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圓二色光譜儀在測試時有哪些注意事項

更新時間:2022-08-05      點擊次數:2611
  圓二色光譜(簡稱CD)是應用廣泛的測定蛋白質二級結構的方法,是研究稀溶液中蛋白質構象的一種快速、簡單、較準確的方法。它可以在溶液狀態下測定,較接近其生理狀態。而且測定方法快速簡便,對構象變化靈敏,所以它是目前研究蛋白質二級結構的主要手段之一,并已廣泛應用于蛋白質的構象研究中。
  圓二色光譜儀的測試注意事項
  (1) 在標準操作時,譜帶寬度選為1 nm。對于高分辨率測量,要用較窄的狹縫寬度,此時光電倍增管的電壓較高,譜的信噪比差。雖然對于正常測量最佳譜帶寬度是1~2 nm,但是在下列情況下要犧牲分辨率而需要較寬的狹縫寬度。當樣品的吸光度很高但CD信號很弱時,一方面要盡量保證測定CD峰所需要的足夠濃度,另一方面要設置較寬的狹縫。不過此時要特別小心,因為樣品在吸光度過高(A>2)的情況下可能存在熒光或雜散光引起的某些假象。另外,在固體CD光譜測試時也需要較大的狹縫寬度(一般要求 > 2 nm)。
  (2)橢圓率和摩爾橢圓率都依賴于測量條件。因此,溫度、波長和樣品濃度總是應該特別注明的。
  (3) 當用壓片法或石蠟油研磨法進行固體粉末樣品測試時,要盡可能地研磨獲得細小均勻的樣品顆粒。采用石蠟油糊方法時,必須注意某些憎水有機化合物可能溶于石蠟油中,這時所得CD光譜在某種意義上應視為溶液CD光譜。采用壓片法測試固體CD時,在保證手性樣品的定性濃度達到CD光譜儀檢測要求的同時,片越薄越透明越好(但切忌破損)。在某些情況下,壓片法不適用于手性抗衡陰離子存在下的固體誘導CD光譜的測定。
  圓二色光譜儀使用時發生故障怎么做
  1、儀器發生故障時應及時報告技術人員處理.儀器發生異常現象時,馬上關閉電源,保護現場并及時上報。
  2、不亂按鍵盤,操作人員不得進入操作規程規定以外的任何程序,不得按規定以外的任何功能鍵.卸下火花臺板時要輕拿輕放,防止內表面劃傷.取出火花室內圓石英墊片和玻璃套管時務必謹慎小心,防止操作不當致其破碎。
  3、壓樣品夾子要垂直,不得在未夾好樣品時按激發鍵,不得在激發時觸摸或抬起樣品夾.如果遇到激發時聲音很大,應該按F3鍵停止,不允許直接抬起樣品夾,否則易造成電路板燒毀。
  4、激發樣品后在火花臺內產生黑色沉積物可導致電極與火花臺之間短路,所以火花臺應定期清理。
  5、非崗位人員不得隨便進入機房,機房內禁止吸煙,吃食物。
  6、如果遇到突然斷電時,應先關總,再將其它電源關閉,等到來電后,按規程條款進行開機操作。

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